Разработка и валидация метода оценки специфической антигемолитической активности препарата экулизумаб (Солирис )

Биоаналитические методы применяются как на стадии разработки и испытания препаратов, так и при серийном выпуске фармацевтической продукции. Оценка качества лекарственных препаратов (ЛП) и субстанций производится с помощью точных и воспроизводимых методов. Точность и воспроизводимость метода проверяются при проведении валидационных работ, которые являются обязательными при регистрации ЛП. Основной задачей валидации метода является экспериментальное доказательство его пригодности для целей, которые должны быть достигнуты. Валидация биоаналитических методик – это один из элементов валидации всего процесса производства лекарств [1, 2].

Цель исследования: валидация разработанного в ООО «МБЦ «Генериум» метода оценки специфической антигемолитической активности препарата экулизумаб.

Материалы и методы: препарат экулизумаб, сенсибилизированные антителами куриные эритроциты, комплемент-содержащая сыворотка человека.

Результаты: при валидации метода показаны его специфичность и соответствие критериям — правильность определения относительной специфической активности (103.0±1.4)%), устойчивость (CV – 11.5%), сходимость – (CV – (4.9±0.9)%), воспроизводимость – (CV – (3.5±0.4)%) и линейность (k-1.0275;R2 – 0.9975). При валидации в целом подтверждена пригодность системы (оборудование, материалы, аналитические операции и анализируемые образцы) для получения достоверного результата.

Обсуждение результатов. При валидации метода получено экспериментальное доказательство его пригодности для достижения поставленной цели – оценки специфической активности препарата экулизумаб. Простота исполнения метода позволит получать точные результаты при его применении в других лабораториях. Разработанный метод может быть использован не только для определения специфической активности ЛС Солирис, но и других фармацевтических субстанций и лекарственных средств (ЛС) на основе антител аффинных к С5 компонента комплемента человека.

1. ГОСТ Р 52249-2009 «Правила производства и контроля качества лекарственных средств».

2. Findlay J.W.A., Smith W.C., Lee J.W., Nordblom G.D., Das I., DeSilva B.S., Khan M.N., Bowsher R.R. Validation of immunoassays for bioanalysis: a pharmaceutical industry perspective. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2000, N. 21, рр. 1249-1273.

3. Assay Validation Methods – Definitions and Terms. Available from: http://www.fws.gov/aah/PDF/QI-Terms%20and%20Defs.pdf

4. Hill A., Rother R. P., Arnold L., Kelly R., Cullen M.J., Richards S.J., Hillmen P. Eculizumab prevents intravascular hemolysis in patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria and unmasks low-level extravascular hemolysis occurring through C3 opsonization. Haematologica April. 2010, N. 95, рр. 567-573.

5. Johnson R., Hillmen P. Johnson, R. Paroxysmal nocturnal haemoglobinuria: Nature’s gene therapy? J Clin Pathol. 2002, N. 55(3), рр.145−52.

6. Parker C.1., Omine M., Richards S., Nishimura J., Bessler M., Ware R., Hillmen P., Luzzatto L., Young N., Kinoshita T., Rosse W., Socié G. International PNH Interest Group. Diagnosis and management of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria. Blood. 2005, N. 106 (12), рр. 3699-709.

7. Hillmen P., Hall C., Marsh J., Elebute M., Bombara M.P., Petro B.E., Cullen M.J., Richards S.J., Rollins S.A., Mojcik C.F., Rother R.P. Effect of eculizumab on hemolysis and transfusion requirements in patients with paroxysmal nocturnal hemoglobinuria . N Engl J Med. 2004,

8. N. 350 (6). рр. 552−9.

9. Rother R.P., Rollins S.A., Mojcik C.F., Brodsky R.A., Bell L. Discovery and development of the complement inhibitor eculizumab for the treatment of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria . Nat Biotech. 2007, N. 25 (11), рр. 1256–64.

10. Scientific discussion. Available from: h ttp ://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/EPAR_-_Scientific_Discussion/human/000791/WC500054212.pdf

11. Guideline on bioanalytical method validation: http://www.ema.europa.eu/docs/en_GB/document_library/Scientific_guideline/2011/08/WC500109686.pdf.

12. A Step-by-Step Approach to Establishing a Method Validation Program: http://www.ivtnetwork.com/sites/default/files/A%20Step%20by%20Step%20Approach%20to%20Establishing%20a%20Method%20Validation%20Program.pdf

13. Hohensteina A., Hebella M., Zikryb H. Development and validation of a novel cell-based assay for potencydetermination of human parathyroid hormone (PTH). Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 2014, N. 98, рр. 345-350.